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点ji次数:167 发瞛i奔洌?020-06-03

原dai细胞培养shi建议细胞xi的di一步,但shi有很多小伙伴zai原dai细胞上就hui有很多疑惑哦,主要有以xia几大问ti,小编du为大jia整理hao咯,ban上你的小板凳,一起laikankan!

 一、原dai细胞与细胞xi有什么区别?

da:根据传tong定yi,自zu织di一次收获和接种的细胞被称为原dai细胞,这类细胞zhi接从zu织分离,sheng命周qi有限,经数次传dai后hui逐jianting止sheng长。原dai细胞zai有限的sheng命周qi内需掌握hao细胞的大sheng长kong间,以bao持细胞群中基因xing和biaoxing的一zhi衴uⅫ/p>

细胞xishi不断sheng长、分化的细胞萮ai蚱渚齳i传改造,zhi使其具有无限zeng长的潜能。体外sheng长的细胞xiyongyu医疗或科研。

但蔰ao噬希な奔洹⒘拇玠ai培养后,细胞xi随着dai数的zeng加,细胞的基因xing和biaoxingdu有可能发sheng改变。

需要指出的shi,zai不tong的科研小zu中这xie术语的定yihui有所不tong。许多研究员不yong细胞xi这个词biao示细胞萮ai琧hu非细胞经过了yi传改造。 

二、倍zeng和dai数有什么区别?

da:倍zengshi培养物中细胞总数的翻倍,通常shi指细胞指数或对数sheng长qi。dai数shi指细胞群从培养瓶中移出,传dai培养过程的次数,传dai培养的目的,shi使细胞chuyudi密度以ci激其jin一步sheng长。 

 san、接收到的冻存细胞该ru何chu理?

da:收到包装箱后,li即将冻存细胞从干冰移ru液氮中冻存。此过程尽量快,以bi免升温。不要将细胞储存zai-80℃,这yanghui对细胞造成不可wanhui的shanghai。 

四、冻存的细胞该ru何开始培养?

da:主要分为以xia9点:

1.将一guan细胞从液氮guan中qu出,注意bao护手和眼睛。

2.将冻存guan快su的放ru37℃shuiyu中,轻轻握住并旋转,zhi到guan内物体完全融化。

3.将冻存guanli即从shuiyu中拿出,擦干,转ru无菌环jing。

4.yong70%的酒精冲xi冻存guan,然后擦qu多余酒精。

5.打开盖子,注意手指不要碰到里面的luo纹(注意,由yu冻存guan有fu压,开盖时可能hui有少量溢出,这shi正常xian象)。

6.yong多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为mei平方厘米5000个细胞。

7.盖hao培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均詑uuo需要气体交换可打开盖子。

8.将培养瓶放ru培养箱中(37℃,5%CO2,95%kong气)

9.放ru培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以quchu残留的二甲基亚枫和蝐i诘南赴?nbsp;

wu、细胞培养过程中,多久更换一次培养基?

这qu决yu细胞sheng长的su秖uR话愣鴜an2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实yan室通常zai周一,周san,周wu更换培养基。

注意:冻存细胞复苏后,zai6-16小时内更换培养基,以quchu残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。 

六、我能扩zeng培养和再次冻存原dai正常人类细胞吗?

da:这qu决yu细胞的类xing。一xie细胞类xing像神经细胞,神经胶质细胞和一xiesheng长缓慢的上皮细胞,不推荐扩zeng培养和再次冻存。其它的细胞类xing像成必威体育xia载细胞、星形细胞、肾ximo细胞、星形胶质细胞等等,可以扩zeng培养和再次冻存。

然而,需要注意的shi再次冻存的过程可能daozhi细胞sheng长性能的改变。

七、培养瓶中应该加ru多少体积的培养基?

da:我们推荐的yong量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。

 

    

 
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